Средняя величина зоны контрольной концентрации антибиотика
По разности между средней величиной зоны контрольной концентрации, выведенной из всех чашек, и средней величиной зоны контрольной концентрации, определенной из 3 чашек с каждой отдельной концентрацией, находят поправку к величине зоны данной концентрации. Поправку прибавляют к средней величине зоны данной концентрации, если она положительная, и вычитают, если поправка отрицательная.
Пример. Средняя величина зоны контрольной концентрации 1 мкг/мл равна 19,2 мм (выведено из 36 зон). Средняя величина зоны для той же концентрации, выведенная из 3 чашек, на которых испытывался раствор, соответствующий 0,8 мкг/мл, равна 19 мм. Величина поправки составляет +0,2 мм. Средняя величина зоны для концентрации 0,8 мкг/мл составляет 17,9 мм, после внесения поправки: 17,9 мм+0,2 мм=18,1 мм. Таким же образом исправляют значение величин зон для остальных концентраций, используемых при построении стандартной кривой.
На полулогарифмической сетке расчета активности антибиотиков по исправленным значениям величин зон взятых концентраций и средней величине зоны контрольной концентрации строят стандартную кривую, откладывая по оси абсцисс величины зон против значений соответствующих концентраций по оси ординат. При постоянных условиях опыта стандартной кривой можно пользоваться длительно, проверяя угол наклона для каждой вновь приготовленной серии питательной среды по 2—3 концентрациям стандарта на 3—5 чашках.
При определении концентрации антибиотика в сыворотке или другом материале испытуемый субстрат разводят соответствующим растворителем (смотрите таблицу ниже) до уровня, который предположительно соответствует контрольной концентрации.
Смотрите таблицу — Растворы, применяемые для разведения стандартов и испытуемых образцов, условия приготовления и хранения растворов
В зависимости от количества испытуемого материала применяют одну или несколько чашек на каждое разведение. Параллельно с испытуемым материалом на каждую чашку вносят контрольную концентрацию стандарта антибиотика. После инкубации при 37° С в течение 16—18 ч измеряют зоны задержки роста тест-микроба, образуемые контрольной концентрацией стандарта и испытуемым раствором. Разность между найденными средними величинами зон испытуемого образца и контрольной концентрации прибавляют к величине зоны контрольной концентрации на стандартной кривой. Затем по кривой находят концентрацию, соответствующую найденной величине зоны в ЕД/мл или мкг/мл. Умножая полученную концентрацию на степень разведения испытуемого материала, определяют содержание антибиотика в 1 мл испытуемого материала. Точность метода составляет ±10%.
«Рациональная антибиотикотерапия»,
С.М.Навашин, И.П.Фомина
- Значение разработки ускоренных методов определения концентраций в крови и тканях для антибиотиков группы аминогликозидов
- Определение концентрации антибиотика в испытуемом растворе
- Подбор раствора стандарта антибиотика
- Приготовление рабочих растворов стандарта антибиотика и испытуемого материала
- Установка посевной дозы тест-микроба
- Определение концентрации антибиотиков в тканях органов
