Установка посевной дозы тест-микроба



Посевная доза тест-микроба должна быть предварительно установлена для каждой серии среды в пределах цифр, указанных в таблице ниже.

Увеличение плотности посева может сопровождаться образованием густого микробного «газона» и уменьшением размеров зон задержки роста тест-микроба. При засеве недостаточным количеством микробных клеток на поверхности среды не образуется сплошного роста, зоны не имеют очерченного края и не могут быть точно измерены.

Питательные среды и тест-культуры, применяемые при определении активности антибиотиков методом диффузии в агар

Антибиотик Состав питательной Количество среды на каждую чашку Тсст-микроб и посевная доза
1 2 3 4
Бензилпенициллина натриевая или калиевая соль, феноксиметилпенициллин Нижний слой: агар-агар 1— 20 г, двузамещенный фосфат натрия — 3 г, вода дистиллированная—1000 мл, рН послестерилизации 6,8 — 7,0. Верхний слой: бульон Хоттингера с содержанием 130—140 мг% аминного азота— 1000 мл, агар-агар— 10—15 г, двузамещенный фосфат натрия — 3 г, рН после стерилизации 6,8 — 7,0 + 0,1% глюкозы 2 10 мл для нижнего слоя, 5 мл для верхнего Staphylococcus aureus 209 Р; 40 000 000 микробных клетокна 1 мл среды
Метициллин и оксациллии (натриевые соли), ампициллин безводный, ампициллина тригидрат (или натриевая соль) Среда пенициллиновая+1% глюкозы 2 10 мл Bacillus cereus var. mycoides HB, устойчивый к тетрациклинам; 200 000 000 спор на 1 мл среды
Диклоксациллина натриевая соль Среда пенициллиновая+1% глюкозы 2 10мл То же; 20 000 000 спор на 1 мл среды
Карбенициллина динатриевая соль Среда пенициллиновая+1% глюкозы 2 10мл Pseudomonas aeruginosa 2134; 500 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Цефалексин Среда пенициллиновая+1% глюкозы 2 7мл Bacillus subtilis АТСС 6633; 40 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Цефалотин Нижний слой: агар-агар 1—20 г, двуза-мещенный фосфат натрия — 3 г, вода дистиллированная —1000 мл, рН после стерилизации — 6,8—7,0. Верхний слой: среда пенициллиновая+1% глюкозы2 10 мл для нижнего слоя, 5 мл для верхнего Bacillus subtilis АТСС 6633; 40 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Тетрациклина, окситетрациклина, доксициклина и метациклина гидрохлорид Бульон Хоттингера с содержанием 130—140 мг% аминного азота — 1000 мл, агар-агар—10—15 г, рН после стерилизации 6,8—7,0+1% глюкозы2 10 мл Baciilus subtilis, вариант JI2; 30 000 000 спор на 1 мл среды
Стрептомицина сульфат Бульон Хоттингера с содержанием 30—35 мг% аминного азота—1000 мл, агар-агар—15 г, двузамещенный фосфат натрия — 3 г, рН после стерилизации 7,8 — 8,0 10 мл Bacillus cereus var. mycoides 537 (шероховатая форма); 20 000 000 спор на 1 мл среды
Эритромицина основание или фосфат, олеандомицина фосфат Среда стрептомициновая 6 мл Bacillus cereus var. mycoides HB (гладкая форма); 10 000 000 спор на 1 мл среды
Фузидин-натрий Бульон Хоттингера с содержанием 135 мг% аминного азота или казеинового гидролизата—1000 мл, агар-агар—15 г, однозамещенный фосфат калия — 25 г, рН после стерилизации 6,0—6,2+1% глюкозы2 10 мл Corynebacterium xerosis; 50 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Неомицина сульфат Среда стрептомициновая 20 мл для нижнего слоя, 5 мл для верхнего Bacillus cereus var. mycoides 537 (шерохофатая форма); 20 000 000 спор на 1 мл среды
Канамицина сульфат Бульон Хоттингера с содержанием 130—140 мг% аминного азота — 1000 мл, агар-агар—10—12 г, двузаме- щенный фосфат натрия —3 г, рН после стерилизации 7,8—8,0+0,1% глюкозы2 10 мл для нижнего слоя, 5 мл для верхнего Bacillus subtilis АТСС 6633; 100 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Гентамицина и сизомицина сульфат Нижний слой: агар-агар3—20 г, двуза- мещенный фосфат натрия — 3 г, вода дистиллированная—1000 мл, рН после стерилизации 7,8—8,0. Верхний слой: среда канамициновая+0,1% глюкозы2 15 мл для нижне­го слоя, 5 мл для верхнего 3 Bacillus subtilis NCTC 8241; 50 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Флоримицина (виомицин) сульфат Среда канамициновая 10 мл Bacillus subtilis АТСС 6633 (гладкая форма); 40 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Линкомицина гидрохлорид Верхний слой тот же, что для гентамицина. Нижний слой: среда канамициновая 10 мл для нижне­го слоя, 5 мл для верхнего Micrococcus luteus 8340; 50 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Циклосерин Среда пенициллиновая 10 мл Staphylococcus aureus 1787 (устойчивый к стрептомицину); 30 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Рифампицин Бульон Хоттингера с содержанием 130—140 м г% аминного азота — 1000 мл, агар-агар— 10— 15 г, однозамещенный фосфат калия — 25 г, рН после стерилизации 6,0—6,2+1% глюкозы2 10 мл Micrococcus luteus NCTC 9143; 200 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Полимиксина В сульфат Бульон Хоттингера с содержанием 130—140 мг% аминного азота — 1000 мл, агар-агар—10—15 мг, однозамещенный фосфат калия — 25 г, рН пос­ле стерилизации 7,0—7,2. На 100 мл среды добавляют 1 мл твина-80 и 10 мл лаковой крови (3,2 мл сыворотки+6,8 мл дистиллированной воды) 15 мл для нижне­го слоя, 5 мл для верхнего Bordethella bronchisseptica (гладкая форма); 10 000 000 микробных тел на 1 мл среды
Нистатин Мясная вода 1:2—1000 мл, пептон — 10 г, дрожжевой экстракт (в пересчете на сухой остаток) — 4 г, агар-агар — 15 г, рН после стерилизации 6,0—6,2 10 мл для нижнего слоя, 15 мл для верхнего Torula utilis 0,1—0,2 мл взвеси на 100 мл среды
  1. Количество агар-агара в средах указано для цилиндро-чашечной модификации. При применении лунок количество агар-агара увеличивают до 25 г на 1000 мл среды.
  2. Глюкозу добавляют в расплавленный агар в виде 40% стерильного раствора.
  3. Указано для луночного метода.


«Рациональная антибиотикотерапия»,
С.М.Навашин, И.П.Фомина

Смотрите также на тему: